還需要考慮其他将CAR-T細胞與抑制性分(fēn)子隔離(lí)的策略，例如阻斷CAR-T細胞和TME中(zhōng)的免疫抑制信号。 由于TGF-β信号傳導是重要的抑制途徑，因此促進抗腫瘤反應的可行替代方法是阻斷TGF-β信号傳導。一(yī)組發現，在臨床前前列腺癌模型中(zhōng)，TGF-β顯性負性受體(tǐ)（DNR）可以有效地保護CAR T細胞免受免疫抑制細胞因子的幹擾，從而抑制信号轉導。或者，用受體(tǐ)工(gōng)程改造的CAR T細胞将TGF-β信号轉化爲4-1BB或IL-12刺激信号，發揮強大(dà)的抗腫瘤作用，并對免疫抑制信号産生(shēng)抗性。另一(yī)小(xiǎo)組還發現，TGF-βCAR T細胞具有增強的細胞毒性和增強的抗腫瘤免疫功能，可以保護相鄰的免疫細胞免受TGF-β介導的免疫抑制作用。

同樣，對胰腺癌模型的研究表明，表達倒置細胞因子受體(tǐ)的CAR T細胞可以促進T細胞存活。IL-4的細胞外(wài)部分(fēn) 融合受體(tǐ)和IL-7受體(tǐ)的細胞内片段，将免疫抑制細胞因子信号轉化爲激活信号。誘導内源性抗腫瘤免疫反應和增強共刺激信号的方法也已被探索[56]。另外(wài)，諸如營養缺乏，低pH值和低氧等代謝紊亂是TME的另一(yī)個特征，而代謝競争進一(yī)步限制了CAR-T細胞的活性。改革CART細胞的代謝途徑可能是另一(yī)種策略。例如，在低氧條件下(xià)，可以穩定表達轉錄因子低氧誘導因子1-α（HIF-1α）。通過修飾CAR T細胞表達HIF-1α，這些細胞具有抗缺氧的能力，從而導緻CAR表達增加和溶瘤作用改善抗腫瘤作用。

最近的研究集中(zhōng)在使用基因沉默技術，例如CRISPR / Cas9或短發夾RNA（shRNA），直接敲除CAR T細胞中(zhōng)編碼抑制性受體(tǐ)PD-1的基因。例如，一(yī)組通過CRISPR/Cas9使抗CD19 CAR T細胞中(zhōng)的PD-1沉默，并在PD-L1陽性腫瘤模型中(zhōng)顯示出挽救的T細胞活性和提高的抗腫瘤功效。MSLN CAR T細胞沉默PD-1基因導緻内源性PD-1水平下(xià)調，T細胞擴增增強和腫瘤細胞裂解。

修飾CAR T細胞以表達轉換受體(tǐ)似乎是克服免疫檢查點或抑制分(fēn)子的一(yī)種有吸引力的策略，這可以将抑制信号轉換爲刺激信号。通過将免疫抑制信号的胞外(wài)區域與激活的細胞内結構域融合來創建PD-1開(kāi)關受體(tǐ)，并将PD-L1信号轉化爲刺激信号，從而抵抗T細胞功能障礙并促進腫瘤消退。還已經探索了改造具有顯性負PD-1受體(tǐ)的CAR T細胞的嘗試。由于缺乏跨膜區段和細胞内信号轉導結構域，具有DNR的T細胞具有與内源性細胞受體(tǐ)競争結合PD-1的能力，但不能轉導抑制性信号。此外(wài)，已經證明可以釋放(fàng)PD-1 bloking抗體(tǐ)的工(gōng)程CAR T細胞可以增強CAR T細胞的抗腫瘤作用。

盡管血液系統惡性腫瘤的緩解率很高，但患者在CAR T細胞治療後仍缺乏持續緩解，最終會出現疾病複發。CAR-T細胞的功能與患者的臨床結局密切相關，并且這些細胞在體(tǐ)内的激活，殺傷功能和持久性是受多種因素（例如腫瘤因素，T細胞因素和個體(tǐ)）影響的動态過程。因素。每個方面都可能影響CAR T細胞的應用，因此僅通過單調的方法似乎不足以解決這些複雜(zá)的因素。除了直接對T細胞進行遺傳修飾外(wài)，還應探索克服CAR-T細胞擴增不足并增強體(tǐ)内持久性的替代策略。通過直接增強T細胞的功能或通過募集内源性免疫細胞以及重塑TME，組合疫苗，生(shēng)物(wù)材料和溶瘤病毒的最新進展具有實現預期結果的良好應用前景。

通過特異性誘導T細胞攻擊腫瘤，治療性癌症疫苗已成爲癌症治療中(zhōng)的關鍵突破。一(yī)些研究發現，雙特異性T細胞表達針對腫瘤的CAR和針對強免疫原（例如流感病毒）的内源性T細胞受體(tǐ)（TCR），它們在用免疫原疫苗免疫後顯示出強大(dà)的擴增能力和抗腫瘤活性。